一、实验目的
掌握品红亚硫酸比色法测定白酒中甲醇的原理及操作,了解分光光度法的应用。
二、实验原理
甲醇在酸性条件下被高锰酸钾氧化为甲醛,过量高锰酸钾用草酸去除。甲醛与品红亚硫酸(希夫试剂)反应生成紫色络合物,其吸光度与甲醇浓度成正比,通过标准曲线法定量。
三、试剂与仪器
试剂甲醇标准溶液(0.1 mg/mL)高锰酸钾-磷酸溶液(30 g/L KMnO₄,15% H₃PO₄)草酸-硫酸溶液(50 g/L 草酸,浓H₂SO₄与H₂O体积比3:1)品红亚硫酸溶液(0.2% 碱性品红,NaHSO₃脱色)无甲醇乙醇(空白对照)仪器分光光度计恒温水浴锅比色管(25 mL)移液管、容量瓶等玻璃仪器四、实验步骤
1. 标准曲线绘制
取甲醇标准液(0、0.2、0.5、1.0、2.0 mg/L)各1.0 mL于比色管中。加高锰酸钾-磷酸溶液2 mL,摇匀静置10分钟(氧化)。加草酸-硫酸溶液2 mL,褪色后摇匀。加品红亚硫酸溶液5 mL,摇匀后30℃水浴显色30分钟。以空白为参比,580 nm处测吸光度。2. 样品处理
取白酒样品1.0 mL(若浓度高需稀释),按标准步骤处理。五、数据记录与处理
| 甲醇浓度 (mg/L) | 吸光度 (A) |
|||
| 0 | 0.000 |
| 0.2 | 0.085 |
| 0.5 | 0.210 |
| 1.0 | 0.430 |
| 2.0 | 0.860 |
标准曲线方程:A = 0.430C + 0.005(R²=0.999)样品吸光度:0.250 → 计算浓度C = (0.2500.005)/0.430 = 0.57 mg/L原酒样浓度:0.57 mg/L × 稀释倍数(若稀释10倍则为5.7 mg/L)六、注意事项与误差分析
注意事项显色需严格控温(30±1℃)和时间(30 min)。高锰酸钾需完全去除,避免干扰显色。操作浓硫酸时佩戴防护用具。误差来源显色条件波动(温度/时间)导致颜色变化。样品中乙醛等干扰物(需蒸馏预处理)。试剂纯度或配制误差。七、结论
通过品红亚硫酸比色法测得白酒中甲醇含量为X mg/L,符合国家标准(≤0.4 g/100 mL)。实验验证了该方法操作简便、灵敏度高,但需注意干扰物影响。
参考文献
GB/T 5009.48-2016《蒸馏酒卫生标准的分析方法》